عیین توالی و بررسی خصوصیات مولکولی ژن بتا 1و 4اندوگلوکاناز سویهBacillus subtilis B5d

این پژوهش به منظور تعیین برخی ویژگی های کاتالیتیکی و خصوصیات مولکولی ژن کدکنندهآنزیم بتا 1و 4اندوگلوکاناز در سویه Bacillus subtilis B5d انجام شد. ژن کدکننده این آنزیمدر سویه B5d توسط آغازگرهای اختصاصی تکثیر، تعیین توالی و در پایگاه اطلاعاتی NCBI ثبتشد. تجزیه توالی حاصله و رسم درخت فیلوژنی با استفاده از نرم افزار Vector NTIو Mega.4انجام شد. براساس نتایج حاصله قطعه تعیین توالی شده شامل 794نوکلیوتید بود که یک رشتهپپتیدی با 264اسیدآمینه را کد میکند. تجزیه توالی آمینواسیدی این ژن در سویه مورد بررسینشانداد که آنزیم اندوبتاگلوکاناز تولیدشده توسط سویه مورد پژوهش چندبخشی بوده که قسمتباند شونده به سلولز (Cellulose Binding Domain, CBD)آن مربوط به خانوادهگلیکوزیدهیدرولاز 3و قسمت کاتالیک(CD)آنزیم مورد بررسی متعلق به خانوادهگلیکوزیدهیدرولاز 5است. همچنین فعالیت آنزیم بتا 1و 4اندوگلوکاناز تولید شده توسط سویه ،B5dدر محدوده دمایی 30-70درجه سانتیگراد و 4/6 pH مورد بررسی قرار گرفت. نتایجنشان داد که بیشترین فعالیت کاتالیتیک آنزیم بتا 1و 4اندوگلوکاناز در دمای 55درجه سانتیگرادبوده که 461/83 U/L برآورد شد. بررسی پایداری آنزیم در شرایط دمایی و pH های مختلفنشانداد که تا دمای 60 درجه سانتیگراد و در محدوده 5-10 pH آنزیم پایداری بهتری دارد

کلیدواژه ها:

تجزیه فیلوژنی ، باسیلوس سابتیلیس ، پایداری آنزیمی ، ژن بتا1و 4اندوگلوکاناز ، سویه B5d