استفاده از تکنیکPCR کمی برای کمیت سنجیFusarium solani f. sp. Phaseoli در لوبیا سفید حساس و مقاوم

بیماری پوسیدگی فوزاریومی ریشه لوبیا توسط بیمارگر خاکزی Fusarium solani f. sp. phaseoli ایجاد میشود و خسارت فراوان در مزارع لوبیا در دنیا و ایران ایجاد میکند. در حال حاضر مهمترین و اقتصادی ترین روش کنترل این بیماری استفاده از ارقام مقاوم میباشد. برای این منظور در این تحقیق عکسالعمل پنج رقم رایج کشت و 14 لاین لوبیا سفید به قارچ عامل بیماری پوسیدگی فوزاریومی ریشه لوبیا ابتدا به صورت ارزیابی علایم بیماری و سپس کمیت سنجی با Real time PCR انجام شد. بر اساس نتایج ارزیابی علایم بیماری لاین KBC43106 و رقم درسا به ترتیب حساس و متحمل شناخته شدند، سپس به منظور ارزیابی کمی و روند رشد قارچ عامل بیماری در لاین حساس و رقم متحمل گیاهچه های دو برگچه ای با غلظت 107 اسپور در میلی لیتر قارچ عامل بیماری به روش فرو بردن ریشه (Root dip) تلقیح گردیدند و در فواصل زمانی صفر،2 ، 7، 15، 21 و 30 روز پس از آلودگی از ریشه گیاه چه های تلقیح شده و شاهد نمونه برداری و استخراج DNA از آنها انجام شد. روند افزایش تدریجی میزان DNA قارچ موجود در ریشه ها با استفاده از تکنیک Real time PCR و به کارگیری سیستم SYBR Green همراه با آغازگرهای اختصاصی برای ژن elongation factor 1-α کمیت سنجی گردید. نتایج نشان داد تفاوت معنی-داری بین مقدار DNA بیمارگر در ریشه گیاهان حساس و متحمل وجود دارد و بنابراین تکنیک Real time PCR ، تکنیک مناسبی برای ارزیابی مقاومت ارقام و لاین های لوبیا میباشد.

کلیدواژه ها:

پوسیدگی فوزاریومی ریشه ، ارزیابی مورفولوژیک ، کمیت سنجی ، رقم ، لاین