تشخیص ژن هایStxبا استفاده ازMultiplex PCRدر نمونه های بالینی

زمینه و اهداف: تاکنون روش های مختلف تشخیصی از جمله کشت سلولی، الایزا، RFLP برای شناسایی شیگاتوکسین ها بکار رفته ولی باتوجه به داشتن هزینه زیاد، صرف زمان زیاد وداشتن حساسیتپائین کمتر مورد توجه واقع شده اند دراین تحقیق برای شناسایی ژن stx و از روش Multiplex PCR استفاده شد. مواد و روش کار: تاکنون روش های مختلف تشخیصی از جمله کشت سلولی، الایزا، RFLP برایشناسایی شیگاتوکسین ها بکار رفته ولی باتوجه به داشتن هزینه زیاد، صرف زمان زیاد وداشتن حساسیت پائین کمتر مورد توجه واقع شده اند دراین تحقیق برای شناسایی ژن stx و از روش Multiplex PCRاستفاده شد. یافتهها: هر جفت پرایمر به طور اختصاصی برای ژن های مورد نظر عمل نموده و قطعات مورد نظر از PCR بدست آمد. ازبین سویه های مثبت 31 سویه حاوی ژن Stx2 4 سویه حاوی ژن ، Stx1 و 4 سویهحاوی Stx1 و Stx2 بوده است. در ژنوم تخلیص شده از دیگر باکتری های گرم منفی تکثیری مربوط به قطعات این توکسین صورت نگرفت. تعیین توالی انجام شده صحت قطعات تکثیرشده رامورد تائید قرار داد.حساسیت واکنش برای شناسایی ژن Stx1 3/65 پیکوگرم در ماکرولیتر و ، Stx2 3/80 پیکوگرم در ، ماکرولیتربود. سویه های مثبت همگی به پادزیست های سفکسیم، جنتامایسین، آمیکاسین، سفتریاکسون، نیتروفورانتین حساس بودند . نتیجهگیری: این روش یکی از روش های سریع و دقیق برای تشخیص انواع شیگاتوکسین ها می باشد و می توان ازآن درجهت شناسایی ژن های باکتری های تولید کننده شیگا توکسین استفاده نمود

کلیدواژه ها:

سندرم اورمی همولتیک ، Shigella dysenteriae ، E.coli O157:H7 ، Multiplex PCR