Design of Primers for Pertussis Diagnosis by Real Time-PCR and Determination of its Sensitivity and Specificity in omparison with Commercial Kits

در کشور ما واکسیناسیون سیاهسرفه سالهاست که انجام میشود و در 58 % موارد- ایمنی کامل به وسیله واکسیناسیون و یا احیاناً ابتلا به بیماری ایجاد گردیده است؛ لذا همهگیری های 2 8 ساله ناشی از شیوع مجدد در بزرگسالان غیر ایمن است که سبب ابتلا کودکان و شیرخواران میشود.روش Real-time PCR با توجه به نواحی ژنومی محافظتشده و میزان اختصاصیت پرایمر مورد استفاده میتواند یک روش جایگزین آسان، ارزان، سریع و با حساسیت بالا باشد. مواد و روش کار: در یک مطالعه کاربردی 071 سوآب نازوفارنژیال از کودکان شیرخوار باسابقه سرفه بیش از 2 هفته به دست آوردیم. در اولین مرحله تشخیص باکتری بوردتلا پرتوسیس با روش کشت وReal-time PCR با استفاده از کیت خارجی انجام شد و سپس با پرایمرهای جدید طراحیشده، آزمایش تکرار گردید.یافتهها: عملکرد پرایمرهای مذکور به منظور تشخیص بیماری سیاهسرفه بر اساس یافتههای کیتتجاری و راهنمای کلاسیک تشخیصیWHO و CDC قابلقبول است. در این پروژه نتایج حاصل از کیتتجاری با روش طراحیشده مطابقت داشته و حداقل کپی قابلتشخیص در این روش copies/ml 01 درمقایسه با کیت تجاری که copies/ml % 21 بود بدست آمد. همچنین در این روش حساسیت و ویژگی 100% بدست آمد. نتیجهگیری: آزمون Real-time PCR با پرایمرهای جدید، در مقایسه با روش کشت، آزمون تائیدی مناسبتر, با حساسیت، ویژگی و ارزش های اخباری بالاتر برای تشخیص بیماری است. با این روش میتوان به تشخیص سریعتر بیماران و درمان آنها پرداخت و از سایر عوارض بیماری جلوگیری کرد.

کلیدواژه ها:

بوردتلا پرتوسیس ، Real-time PCR