کلونینگ، بیان و ارزیابی عملکرد ژن PprI داینوکوکوس رادیودورانس در اشریشیا کلی

ژن PprI یکی از ژنهای جدید شناختهشده در باکتری داینوکوکوس رادیودورانس میباشد که نقش اساسی در ترمیم DNA و مقاومت این باکتری نسبت به اشعه ماورای بنفش دارد. هدف این مطالعه کلون، بیان و بررسی خصوصیات ژن PprI در اشریشیاکلی میباشد.مواد و روش کار: ژن PprI باکتری داینوکوکوس رادیودورانس در حامل کلونینگ pGEM بهصورت سنتتیک ساختهشده و در وکتور pET21a سابکلون گردید. حامل پلاسمید بیانی pET21a حاوی ژن PprIدر اشریشیاکلی سویه Origami ترانسفورم گردید و بیان پروتئین با استفاده از SDS-PAGE و وسترن- بلات بررسی شد. همچنین میزان مقاومت به اشعه UV-C در باکتری اشریشیا کلی نوترکیب تعیین شد.یافتهها: در این مطالعه وکتور pET21a حاوی ژن PprI به همراه دم انتهایی هیستیدینی ساخته شد و شرایط بهینه برای بیان پروتئین نوترکیب PprI تعیین گردید. همچنین اشریشیا کلی نوترکیب نسبت به سویه فاقد ژن PprI به اشعه UV-C مقاومتر شده بود. نتیجهگیری: نتایج این مطالعه نشان میدهد که پروتئین نوترکیب PprI میتواند گزینه مناسبی بهعنوانپروتئین مقاوم به پرتو باشد. همچنین میتوان پروتئین تولیدشده را خالصسازی کرده و میزان مقاومت به اشعه UV-C را در سیستمهای پروکاریوتی و یوکاریوتی نیز بررسی نمود.

کلیدواژه ها:

مقاومت به اشعه UV-C ، داینوکوکوس رادیودورانس