تهیه و ارزیابی آنتی ژن MS مخصوص HI برای شناسایی گله های ماکیان آلوده

مایکوپلاسما سینوویه (MS) از مهمترین مایکوپلاسماهای بیماریزا در ماکیان می باشد. عفونت مایکوپلاسما سینوویه اغلب به صورت یک عفونت تحت بالینی بخش فوقانی دستگاه تنفس نمایان می شود و هنگامی که با بیماریهای نوکاسل ND، برونشیت عفونی IB یا هردو آنها توام شود. می تواند ضایعاتی را در کیسه های هوایی ایجاد کند. در دیگر مواقع MS به صورت سیستمیک در می آید و منجر به سینوویت عفونی می شود که یک بیماری حاد تا مزمن ماکیان و بوقلمون ها است و بطور عمده غشاهای سینوویال مفاصل و غلاف تاندون ها را در گیر می کند. از آنجا که عفونت Ms به طور عمودی منتقل می گرددف شناسایی گله های مادر و یا اجداد آلوده و حذف گله های مثبت از موثرترین اقدامات در مبارزه با این عفونت است. هدف از این تحقیق ابتدا تولید آنتی ژن MS مخصوص آزمایش HI بود که به طور تجارتی در دسترس نبود و سپس م قایسه آزمایش HI با روش های RSA و ELISA صورت گرفت و در نهایت پیشنهاد بهترین و دقیقترین مدل برای آزمایش های غربالگری و تاییدی در کشورمان انجام شد. بدین منظور سوش مناسب MS در محیط کشت مایع مخصوص رشد MS تکثیر گردید و با چند پاساژ و انتقال به حجم های بزرگتر، به محض شروع تغییر رنگ محیط با سانتریفوژ نمودن آن، باکتری تکثیر شده از محیط کشت تفکیک شد. با افزودن گلیسرین و PBS به رسوب باکتری آنتی ژن تهیه گردید. پس از آ با تعیین عیار HA آنتی ژن، 4 و 8 واحد ه ماگلوتیناسیون از آنتی ژن تهیه گردید و آزمایش HI راه اندازی شد. 432 نمونه سرم با روش RSA مورد آزمایش قرار گرفت. از این تعداد 215 نمونه مثبت، 32 نمونه مشکوک و 185 نمونه منفی شد. نمونه های مثبت آزمایش RSA در آزمایشهای HI و ELISA بررسی شدند و به ترتیب 54 و 60 درصد آنها در این دو آزمایش تایید شدند. در مقایسه نتایج HI و ELISA همخوانی قابل قبولی وجود داشت. نتایج این تحقیق توانایی جایگزینی آزمایش HI به جای ELISA را نشان داد ولی با توجه به بررسی مزایا و معایب آزمایشهای مختلف در تحقیقات جدید انجام شده در سراسر دنیا، بنظر می رسد که دقیقترین روش ردیابی گله های آلوده استفاده از آزمایش ELISA به عنوان روش غربالگری و روش PCR به عنوان روش تایید موارد مثبت است. هر چند استفاده از آزمایش های RSA و HI به ترتیب به عنوان روش های غربالگری و تاییدی به عنوان یک روش کم هزینه ترولی با دقت به مراتب کمتر نیز در مواردی ممکن است مطرح شود. مجله دانشکده دامپزشکی دانشگاه آزاد اسلامی واحد گرمسار، 1386، دوره 3، شماره 1، 58-49.

کلیدواژه ها:

تولید ، ارزیابی ، آنتی ژن ، مایکوپلاسما سینوویه (MS) ، آزمایش ممانعت از هماگلوتیناسیون (HI)