کلونینگ و تعیین توالی ژن LACK در لیشمانیا اینفانتوم سویه ایران

لیشمانیوز احشایی سگ ها یک بیماری تک یاخته ای ژیونوز است که به طور بالقوه در انسان ها و سگ ها کشنده است. در ایران این بیماری شایع است و توسط لیشمانیا اینفانتوم سویه استاندارد ایران leishmania infantum Lon 49 ایجاد می شود. چندین پروتیین جهت واکسیناسیون مورد استفاده قرار گرفته است، یکی از این پروتیین ها، پروتیین receptors for activated C kinase Leishmania homologue for( LACK) با وزن مولکولی 36 کیلو دالتون است. با توجه به گسترش وسیع لیشمانیوز احشایی سگ ها در ایران در مطالعه حاضر کلونینگ مولکولی آنتی ژن محافظتی LACK لیشمانیا اینفانتوم سویه ایران جهت تولید پروتیین نوترکیب موثر مد نظر قرار گرفت. بدین منظور DNA ژیومیک لیشمانیا ا ینفانتوم سویه ایران استخراج و سپس به عنوان الگو جهت PCR استفاده شد. سپس محصول PCR قطعه ی LACK درون حاملpTZ57R/T کلون شد. پلاسمید نوترکیب استخراج و به وسیله آزمون های تعیین توالیف هضم با آنزیم های محدود کننده و PCR آزمایش شد. نتایج نشان داد که ژن LACK به درستی در حامل Ptz57r/t کلون شده است و همان طور که ا نتظار داشتیم قطعه، 939 جفت بازی است. این مطالعه اولین گام جهت طراحی DNA واکسن بر پایه قطعه ی LACK لیشمانیا اینفانتوم سویه ایران به منظور بیان پروتیین نوترکیب جهت مطالعات بعدی است.

کلیدواژه ها:

لیشمانیا اینفانتوم ، LACK ، کلونینگ ، واکسن