جداسازی و شناسایی باکتریهای نمکدوست نسبی تولیدکننده هیدرولازهای خارج سلولی از تالاب گاوخونی ایران

آنزیمهای هیدرولیتیک خارج سلولی در صنایع مختلف مانند صنایع غذایی، صنایع شیمیایی و علوم پزشکی دارای کاربردهای زیادی هستند و میکروارگانیسم های نمک دوست منبع مناسب برای تولید این آنزیمها هستند. هدف از این مطالعه جداسازی و شناسایی باکتریهای نمکدوست نسبی تولیدکننده هیدرولازهای خارج سلولی از تالاب گاوخونی ایران میباشد. نمونه های خاک گرفته شده از نقاط مختلف تالاب در محیط کشت نوترینت آگار دارای 5 درصد نمک کشت داده شد. به منظور خالص سازی سویه ها، پس از رشد و ظاهر شدن کلنی، از تک کلنی ها کشت خالص به عمل آمد. آزمایشات سنجش توانایی تولید آنزیم هیدرولیتیک خارج سلولی در سویه های منتخب خالصسازی شده بر اساس سنجش توانایی آنان در تولید 5 نوع آنزیم برون سلولی شامل آمیلاز، پروتئاز، لیپاز، دئوکسیریبونکلئاز (DNase) و سلولاز بر روی محیط ویژه محتوی سوبسترای مورد نظر و 5 درصد نمک کشت داده تا بتوان تولید آنزیم را در آنها مشاهده کرد . درمجموع 17سویه از باکتریهای نمکدوست که از نقاط مختلف تالاب جداسازی شدند جهت مطالعات آنزیمی انتخاب شدند. نتایج نشان دادند که باکتریهای تولیدکننده آنزیمهای سلولاز، آمیلاز، لیپاز، پروتئاز و DNase به ترتیب 70/58، 58/82، 35/29، 82/35 و 5/88 درصد بودند و در میان این سویهها تعدادی قادر به تولید مخلوطی از آنزیمها بودند. بیشترین میزان آنزیم تولیدشده مربوط به آنزیم پروتئاز و کمترین میزان آنزیم تولیدشده مربوط به آنزیم DNase بود. از این سویه ها، سویه S17 قادر به تولید مخلوطی از 4 آنزیم، S19 و S14 فقط یک آنزیم و مابقی سویه ها مخلوطی از 2 یا 3 آنزیم بودندنهایتا. سویه های منتخب ازنظر ویژگی فیلوژنی و مولکولی با تکنیک PCR شناسایی و تعیین توالی شدند، که باکتریهای گرم مثبت مربوط به جنس های Virgibacillus، Bacillus ، Staphylococcous و Planomicrobium و باکتری گرم منفی متعلق به جنس Halomonas بودند.

کلیدواژه ها:

باکتری های نمکدوست نسبی ، آنزیمهای هیدرولیتیک ، واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) ، تالاب گاوخونی