کلونینگ، بیان خارج سلولی و تعیین خصوصیات آنزیمی اندوگلوکاناز نوترکیب در مخمر پیکیا پاستوریس

به دلیل تقاضای روزافزون برای سوخت های فسیلی و مشکلات تأمین آن، محبوبیت و جذابیت سوخت های زیستی به طور روز افزون افزایش می یابد؛ که جایگزین های مناسبی برای فرآورده های نفتی به شمار می روند. با توجه به اینکه تولید این سوخت هاباید مقرون به صرفه باشد پس لازم است مواد اولیه آن ارزان و قابل دسترس باشد. یکی از مناسب ترین مواد اولیه برای تولید سوخت های زیستی استفاده از ترکیبات سلولزی می باشد. از مهمترین میکروارگانیسم های تولید کننده آنزیم سلولاز قارچ درون وکتور (Genbank) سنتز شده با ترجیح کدونی پیکیا پاستوریس EG II می باشد. در این مطالعه ژن Trichoderma reseei قرار داده شد و توسط الکتروپوریشن به درون مخمر پیکیا پاستوریس منتقل شد. پس از انتخاب کلون های pPinkα-HC بیانی SDS انجام شد. پروتئین ترشحی بر روی ژل BMMY و BMGY رشد و بیان پروتئین در محیط های ،EG II نوترکیب حاوی ژنبهینه و پایداری دمایی مورد بررسی قرار pH pH 50 با ˚C بهترین فعالیت را در دمای EG II تایج حاصله نشان داد که آنزیم گرفت. ، برده شد و همچنین خصوصیات بیوشیمیایی آنزیم همچون درجه حرارت بهینه 4/8 دارا می باشد.