اثر فاکتور رشد مشابه انسولین (IGF-I)در آپوپتوز سلولهای تخمدان هامستر چینی در تولیدداروهای زیستی

توانایی کاهش مرگ سلولها ناشی از آپوپتوز و حفظ طولانی مدت بقاء آنها در محی طهای بدون سرم در کشت سلولی موضوعات مهمی در تولید پروتئی نهای نوترکیب می باشد. آپوپتوز، یک فرم از مرگ برنامه ریزی شده سلول است که از طریق حذف سلولهای اضافی و آسیب دیده، تکوین و عملکرد صحیح موجودات چند سلولی را موجب می شود. این فرایند ژنتیکی کنترل شده، یکی از مشکلات اصلی در کشت سلول های جانوری مانند سلولهای تخمدان هامستر چینی(CHO)که از لحاظ صنعتی حائز اهمیت هستند، می باشد. فاکتور رشد مشابه انسولین (IGF-I)فاکتور رشد انتخابی جهت تکثیر سلولهای پستانداران در محی طهای کشت بدون سرم است که علاوه بر فعالیت میتوژنی، دارای فعالیت آنتی آپوپتوزی در برابر محر کهای القاء کننده مرگ از طریق تعامل با گیرنده خاص خود می باشد. ما در این مطالعه، اثر آنتی آپوپتوزی غلظ تهای متفاوتIGF-Iرا، در زمانهای 24 و 48 ساعت بر روی رده سلولهای تخمدان هامستر K1 بررسی کردیم. سلولها در محیط کشتDMEMحاوی آنتی بیوتیک پنی سیلین و استرپتومایسین به همراه ده درصد سرم جنین گاوی (FBS)کشت داده شدند و در طی مطالعهآپوپتوز در سلولها توسط متوتروکسات القاء، سرم حذف و غلظ تهای 10-50 نانوگرم/میلی لیترIGF-Iاضافه شد. سنجش آپ وپتوز توسط کیت تشخیصیCaspase3 و تکثیر سلولها با روشMTT بررسی گردید. نتایج این مطالعه نشان می دهند که فاکتور رشد مشابه انسولین می تواند تراکم سلولهای زنده را برای مدت طولانی حفظ نماید. به عنوان فاکتور آنتی آپوپتوزی،می تواند مرگ برنامه ریزی شده سلولهایCHO-K را در محیط بدون سرم مهار یا کاهش دهد . تعداد سلولها نسبت به کنترل در زمانهای متفاوت افزایش داشته و بقاء سلولی نیز وابسته به غلظت حفظ می شود.

کلیدواژه ها:

آپوپتوز ، سلولهای تخمدان هامستر چینی ، فاکتور رشد مشابه انسولین ، کاسپاز 3 ، کشت سلولی