جداسازی و شناسایی مولکولی یک سویه بومی مولد آنزیم لیپاز و تعیین ثوابت سینتیکی وپارامترهای ترمودینامیکی آنزیم

آنزیم لیپاز در صنایع گوناگون از جمله شوینده ها، صنایع غذایی و داروسازی کاربرد دارد. در این پژوهش جدایه های باکتریایی از پساب کارخانجات روغن نباتی جداسازی شده و مقدار آنزیم تولید شده توسط جدایه ها در محیط کشت جامد حاوی تری بوتیرین به عنوان سوبسترای روغنی مقایسه شد. یک جدایه باکتریایی که هاله ای به قطر 15 میلی متر را تشکیل داده بود انتخاب شده و پس از رشد در محیط کشت مناسب، فعالیت لیپاز خارج سلولی آن در روشناور محیط کشت به میزانU/ml 5 با روش پارا نیترو فنیل پالمیتات و همچنین کیت آنزیمی سنجش لیپاز تعیین گردید. جدایه منتخب با روش مولکولی s rRNA16 توالی یابی و همردیفی به عنوان یک گونه از سودوموناس شناسایی و با نامPseudomonas L.Mدر بانک ژن ثبت شد. سپس ثوابت سینتیکی Km ,Vmآنزیم به ترتیب به میزان (mol/ml.min)49.5 و (mM) 0.77از رسم منحنی لاین ویوربرک محاسبه شدند که مقدار کم Km نشان دهنده تمایل زیاد آنزیم به سوبسترا است. با رسم منحنی آرنیوس، انرژی اکتیواسیون واکنش آنزیمیkJ/mol20.78 و فاکتورQ10 برابر 4.39 به دست آمد که به ترتیب نشان دهنده سرعت بالای واکنش آنزیمی و وابستگی دمایی آن می باشد.

کلیدواژه ها:

لیپاز ، سودوموناس ، ثوابت سینتیکی ، پارامترهای ترمودینامیکی