انتقال سازه اختصاصی بذر حاوی ژن IFNγ به گیاه توتون و تولید KDEL و KOZAK بهمراه توالی گیاهان تراریخت

چکیدهاز مهمترین عوامل موثر بر افزایش میزان تولید پروتئین های نوترکیب در گیاه، بیان آن در بافت مناسب و نیز افزایش پایداری و تجمع پروتئین با استفاده از عوامل هدف گیری کننده به جایگاه های مناسب در سلول می باشد. برای رسیدن به در انتهای ' 3 آن KDEL در انتهای ' 5 و KOZAK انسانی بهمراه توالی IFNγ این هدف در این تحقیق، سازه حاوی ژن 0 تا یک سانتی متر با / استفاده شد. ریزنمونه های برگی توتون به اندازه 5 (napin) تحت کنترل پیشبرنده اختصاصی بذر mg/L ،MS حاوی سازه مدنظر تلقیح و به مدت 48 ساعت در محیط هم کشتی (شامل LBA آگروباکتریوم سویه 4404 نگهداری شدند.گزینش نوساقه های باززایی شده در محیط گزینشگر (شامل محیط هم کشتی (BAP 3mg/L ،NAA 0/1 ژنومی از برگهای جوان DNA 200 سفاتوکسیم) انجام شد. برای آنالیز مولکولی، استخراج mg/L ، 25 کانامایسین mg/L 795bp و قطعه IFNγ 432 مربوط به bp قطعه ،PCR گیاهچه های سبز مانده در محیط گزینشگر انجام گرفت. بعد از PCR مشاهده شد، که انتقال سازه مدنظر به ژنوم گیاه را تایید می کند. جهت تایید بیشتر، واکنش nptII مربوط به ژن 3743 تکثیر شد. همچنین نتیجه bp انجام شد و قطعه مورد انتظار IFNγ و آغازگر پسرو nptII دیگری با آغازگر پیشرو ژن نشان داد که سازه مد نظر به طور کامل به ژنوم گیاه توتون منتقل شده است. XbaI هضم آنزیمی این قطعه با آنزیم برشی

کلیدواژه ها:

توتون. ، KDEL توالی ، KOZAK پیشبرنده ناپین ، توالی ، (IFNγ) اینترفرون گاما