طراحی و ساخت سازه بیانی پروکاریوتی ژن bgn13.1 قارچ Trichoderma virens به منظور تولید آنزیم بتا-1، 3- گلوکاناز در سویه BL21(DE3)pLysS باکتری E. coli
محل انتشار: هفتمین همایش بیوتکنولوژی جمهوری اسلامی ایران
سال انتشار: 1390
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 529
فایل این مقاله در 9 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
NBCI07_1054
تاریخ نمایه سازی: 29 شهریور 1394
چکیده مقاله:
آنزیم های گلوکاناز در موجودات مختلف، مثل باکتریها، گیاهان، قارچ ها و مهره داران وجود دارند. تاکنون انواع مختلفی از آنزیم های بتا- 3،1 -گلوکاناز در گونه های مختلف جنس تریکودرما تخلیص و بررسی شدهاند که یکی از آنها Bgn13.1 می باشد. بررسی 30 جدایه قارچ تریکودرما که اکثراً از مناطق مختلف ایران جمع آوری شده بودند، نشان داده بود، سویه های مختلف گونه های T. atroviridae ،T. harzianum ،T. parceramosum ،Trichoderma virens و T. viridae دارای بیشترین توان تولید این آنزیم های بتا- 1،3 -گلوکاناز می باشند. طی آزمایش های انجام شده برای جداسازی ژن bgn13.1 از این جدایه ها، توالی مورد انتظار این ژن از گونه T. virens تکثیر گردید و نهایتاً cDNA ژن bgn13.1 ا ین گونه جهت ساخت سازه بیانی پروکاریوتی استفاده شد. همسانه سازی ژن bgn13.1 در ناقل pET26b(+) به صورتی انجام گرفت که cDNA این ژن بلافاصله بعد از توالی راهنمای پپتیدی pelB قرار گرفته به طوری که چارچوب بیانی ژن حفظ شد. این توالی راهنما باعث ترشح پروتئین نوترکیب در پریپلاسم باکتری می گردد. همچنین در انتهای ژن، رمز خاتمه ترجمه ژن bgn13.1 حذف شده و بلافاصله بعد از آخرین نوکلئوتید قبل از رمز خاتمه ژن، یک توالی رمز کننده شش هیستیدین به صورت دنباله در انتهای پروتئین قرار گرفت که پس از بیان در سویه BL21(DE3)pLysS باکتری E. coli، خالص سازی پروتئین نوترکیب را با ستون His-Tag ممکن می سازد.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
کسری اصفهانی
پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
سمیه رئوف زاده
پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
زهرا مقدسی جهرمی
پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
مصطفی مطلبی
پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :