افزایش بیان باکتریواپسین نوترکیب در اشرشیا کلی

باکتریورودپسین پلی پپتید تکرشته ای متشکل از 248 آمینواسید و بخش کروموفوری به نام رتینال است. وزن مولکولی آن 26 کیلودالتون است و به عنوان پروتئینی منفرد در غشای بنفش هالوباکتریوم شناخته شده است. بخش پروتئینی باکتریورودپسین، باکتریواپسین نامیده میشود. در این پژوهش برای تولید باکتریواپسین نوترکیب، ژن باکتریواپسین در وکتور pET30a همراه با سیگنال Mistic کلون شد. تولید و بهینه سازی شرایط بیان باکتریواپسین با استفاده از سویه نوترکیب اشریشیا کلی BL21(DE3 در کشت غیرمداوم انجام شد که با این روش تراکم سلولی به OD600=17 رسید. در شرایط بهینه 125mg/L پروتئین نوترکیب بدست آمد که این مقدار پروتئین یکی از بالاترین مقادیر گزارش شده در سیستم غیرمداوم است.