همسانه سازی و انتقال ژن تولید کننده انسولین انسانی به گیاه نعناع

امروزه بیماری دیابت برای سلامت جهانی یک تهدید جدی محسوب می شود و درحال حاضر بالغ بر 3/6 درصد از کل جمعیت جهان با بیماری دیابت زندگی می کنند. باتوجه به افزایش روزافزون بروز بیماری دیابت و از سوی دیگر افزایش هرچه بیشتر تقاضا برای پروتئین انسولین، توسعه سیستم های اقتصادی با بازدهی بالاتر برای تولید این پروتئین مهم از اهمیت بسیار بالایی برخوردار است. هدف از این تحقیق، ابتدا طراحی وساخت وکتور مناسب برای cDNA ی ژن (IGF-1)Insulin-like Growth Factor1 جداسازی شده از سلول های انسانی و سپس انتقال این ژن به گیاه نعناع به عنوان یک سیستم بسیار مناسب برای بیان پروتئین نوترکیب می باشد. درمرحله نخست، cDNA ی ژن IGF-1 با اندازه 336 نوکلئوتید در وکتور پایه pKS همسانه سازی شده و پس از تایید توالی ژن، به وکتور pBIN61 در مقابل پروموتور CaMV 35S جهت بیان در گیاه نعناع منتقل گردید. درمرحله بعد، وکتور نوترکیب pBIN61-IGF-1 با روش الکتروپوراسیون به سویه های LB4404 و GV3303 از آگروباکتریوم انتقال یافت. انتقال وکتور نوترکیب pBIN61-IGF-1 به گیاه نعناع با روش کشت همزمان قطعات برگ نعناع با آگروباکتریوم حاوی پلاسمید مذکور انجام یافت. گیاهان تراریخته پس از باززایی و گزینش از نظر وجود تراژن و بیان آن بررسی مولکولی شدند. تولید انسولین در گیاه نعناع برای نخستین بار در ایران صورت می گیرد که پس از بررسی های بالینی می تواند برای درمان بیماری های دیابتی مورد استفاده قرار گیرد.

کلیدواژه ها:

دیابت ، IGF-1 ، انتقال ژن ، نعناع ، انسولین