تولید آنتی بادی پلی کلونال علیه ویروس تریستزای مرکبات با استفاده از فناوری پروتئین نوترکیب

ویروس تزیستزا یکی از مخرب ترین ویروس های مرکبات می باشدکه هر ساله خسارات فراوانی رادر سراسر جهان به محصول مرکبات واردمی کند. برای تشخیص این ویروس در نمونه های گیاهی و اطمینان از در اختیار گذاشتن نهاده های سالم برای کشاورزان از روش الایزااستفاده می شود که در این روش نیاز به استفاده از آنتی بادی علیه پروتئین سطحی ویروس است. جهت تهیه انواع کیت های تشخیصی بیماری تولید آنتی بادی پلی کلونال ضروری به نظر می رسد و تولید داخلی آن می تواند کمک بزرگی به کاهش هزینه های تشخیص و جلوگیری از شیوع این بیماری در باغات مرکبات کشور باشد. در این تحقیق ابتدا ژن پروتئین سطحی ویروس از نمونه های آلوده جداسازی و سپس این ژن دروکتور بیانی pET28 a(+) کلون شد و این وکتور بیانی حاوی ژن مورد نظر وارد باکتری Ecoli سویه ی BL21 گردید و پروتئین سطحی ویروس تریستزادراین باکتری بیان شد. این پروتئین که دارای نشان هیستیدین می باشد با استفاده از کروماتوگرافی تخلیص شد، پروتئین خالص شده به خرگوش تزریق گردید و آنتی بادی علیه این پروتئین در خون خرگوش تولید شد. درمرحله ی آخر هم برای بررسی حساسیت و اختصاصی بودن آنتی بادی تولید شده از روش الایزا، وسترن بلات و دیبا استفاده شد که نتایج بدست آمده نشان از کیفیت خوب آنتی بادی تولید شده دارد.

کلیدواژه ها:

آنتی بادی پلی کلونال ، ویروس تریستزای مرکبات ، الیزا ، وسترن بلات