بیان دگرساخت و خالص سازی متالوتیونین تیپ 3 از گیاه برنج ( OsMTI-3a) و بررسی قابلیت اتصال آن به فلزات سنگین

سلول های گیاهی دارای مکانیسم های مختلفی به منظور کاهش سمیت فلزات می باشند که از آن جمله می توان به کلائه کننده های پروتئینی فیتوکلاتین و متالوتیونین اشاره نمود . متالوتیونینها گروهی از پروتئین های غنی از سیستئین هستند که با کلائه کردن فلزات سنگین از طریق گروه های سولفیدریل ، اثرات سمی آنها را تعدیل می کنند . در گیاهان ایزوفرمهای متعددی از متالوتیونینها وجود دارد که در بافتهای مختلف بوسیله عوامل القا کننده متنوعی بیان می شوند . در این پژوهش همسانه سازی ژن کد کنند یکی از ایزوفرمهای تیپ 3 گیاه برنج به نام OsMTI-3a در ناقل بیانی pET41a به همراه شریک الحاقی GST در انتهای آمینوصورت گرفت و پروتئین نو ترکیب حاصل در یک سویه از باکتری E.coli بنام Rosetta(DE3) به عنوان میزبان بیانی تولید گردید و با استفاده از روش کروماتوگرافی جذبی خالص سازی شد . پس از خالص سازی پروتئین نوترکیب ، قابلیت اتصال آن به فلزات نیکل، کادمیوم، روی و مس بوسیله واکنش با DTNB مورد سنجش قرار گرفت . نتایج نشان داد که تمایل پروتئین نوترکیب به فلزات به صورت Cu2+Cd2+ > Ni2+ >Zn2+ > می باشد .

کلیدواژه ها:

فلزات سنگین ، برنج ، متالوتیونین ، بیان هترولوگ ، DTNB