سنتز و کلونینگ ژن آنزیم اندوگلوکاناز II به منظور بیان در مخمر

سال انتشار: 1391
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 818

نسخه کامل این مقاله ارائه نشده است و در دسترس نمی باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

NCNCMB01_043

تاریخ نمایه سازی: 14 شهریور 1393

چکیده مقاله:

مقدمه:سلولز و پلی ساکاریدهای مشابه آن فراوان ترین ماده آلی روی زمین می باشند. تجزیه سلولز توسط میکروارگانیسم های حاوی آنزیم سلولاز انجام پذیر است.این آنزیم شامل 3دسته ی: اندوگلوکاناز، اگزوگلوکاناز و بتا-گلوکوزیداز می باشد.اندوگلوکاناز درون زنجیره را برش می دهد، اگزوگلوکاناز از انتها پیوندها را می شکند و سلوبیوز تولید می کند ، بتا-گلوکوزیداز سلوبیوز را به گلوکوز تجزیه می کند.قارچ Trichodermareesei حاوی سلولاز است که به علت بازدهی بالای آنزیم اندوگلوکاناز آن، کاربردهای زیادی دارد و محصول نهایی یعنی اتانول زیادی تولیدم یکند.هدف: کلونینگ ژن آنزیم اندوگلوکاناز به منظور بیان در مخمر پیکیاپاستوریس می باشد. از آنجا که منبع آنزیم یک یوکاریوت است، از سیستم های بیانی یوکاریوتی از قبیل مخمرها استفاده می شود. روش مطالعه: ژن اندوگلوکاناز قارچ Trichodermareese توالیی ابی شد و باتوجه به ترجیح کدونی میزبانبیانی پیکیا پاستوریس طراحی و در وکتو رکلونینگ PMA سنتز شد.ساز هی حاوی ژن موردنظر، بااستفاده ازروش شوک حرارتی به باکتری اشرشیاکلای و از آن به مخمر پیکیاپاستوریس با روش الکتروپوریشن انتقال داده شد. یافته ها: انتقال و حضور ژن موردنظر در باکتری و مخمر با رو شهای PCR ، هضم آنزیمی ، تع یین توالی تا یید شد. بحث ونتیجه گیری: سنتز ژن موردنظر با توجه به ترجیح کدونی پیکیاپاستوریس انجام شد و و از طریق پلازمی دکلونینگ PMA به اشرشیاکلای و سپس از طریق وکتوربیانی به مخمر وارد شد، داده های حاصل از ژ لالکتروفورز نشانگر حضورپلازمید حاوی ژن مور دنظر در مخمر می باشند.

نویسندگان

فرناز نیکزاد جمنانی

دانشگاه شهید بهشتی، دانشکده ی مهندسی انرژی و فناوری های نوین، گروه بیوتکنولوژی، آزمایشگاه نانوبیوتکنولوژی؛ دانشگاه آزاد اسلامی واحد علو

سید امید رعنایی سیادت

دانشگاه شهید بهشتی، دانشکده ی مهندسی انرژی و فناوری های نوین، گروه بیوتکنولوژی، آزمایشگاه نانوبیوتکنولوژی

سهراب مرادی

دانشگاه شهید بهشتی، دانشکده ی مهندسی انرژی و فناوری های نوین، گروه بیوتکنولوژی، آزمایشگاه نانوبیوتکنولوژی

محمدتقی برجیان بروجنی

دانشگاه شهید بهشتی، دانشکده ی مهندسی انرژی و فناوری های نوین، گروه بیوتکنولوژی، آزمایشگاه نانوبیوتکنولوژی