همسانه سازی و بیان ژن LicBM2 کد کننده آنزیم بتاگلوکاناز در باکتری اشرشیای کلی
سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 665
فایل این مقاله در 8 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
این مقاله در بخشهای موضوعی زیر دسته بندی شده است:
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
NEWCONF01_224
تاریخ نمایه سازی: 16 خرداد 1394
چکیده مقاله:
بتاگلوکاناز یکی از مهمترین آنزیم های مورد استفاده در تغذیه طیور می باشد. با توسعه مهندسی ژنتیک، امروزه از باکتری ها برای تولید پروتیئنهای انسانی و دامی استفاده می شود. هدف از این تحقیق، بررسی بیان ژن بتاگلوکاناز همسانه سازی شده در ناقل بیانی و تولید این پروتئین نوترکیب در باکتری اشرشیاکلی بود تا امکان تولید آن به صورت صنعتی فراهم گردد. ژن بتاگلوکاناز با استفاده از پرایمرهای اختصاصی از ژنوم پلاسمید pBI جداسازی شد و در ناقل بیانی pET22b+ کلون گردید. جهت بیان پروتئین نوترکیب موردنظر، اشرشیاکلی سویه BL 21 حاوی ناقل به محیط کشت LB انتخابی حاوی آنتی بیوتیک آمپی سیلین 50 میکروگرم برمیلی لیتر تلقیح گردید. پس از نمونه گیری القاگر IPTG یک میلی مولار به محیط کشت باکتریایی BL افزوده شد. درزمان های 6، 4، 2 ساعت بعداز القا نمونه گیری انجام شد. پروتئین کل به روش رسوب گیری از باکتری BL 21 استخراج گردید و آشکارسازی پروتئین ها با استفاده تکنیک SDS-PAGE 12./. رنگ آمیزی کوماسی برلیانت بلو مورد بررسی قرارگرفت. در نمونه های القایی باند قوی پروتیئنی درمحدوه ی 25کیلودالتون نشانگر پروتئینی مشاهده شد درحالیکه درسلول های غیرالقایی باند ضعیفی مشاهده شد و همچنین نمونه های 2 و 4 ساعت بعد از القا باند قوی تری را نسبت به سایر زمانهای القا نشان دادند، این باند نشان دهنده ی بیان ژن بتاگلوکاناز در باکتری اشرشیاکلی می باشد.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
حکیمه افشین
دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی درکشاورزی، دانشگاه شهرکرد
ندا میرآخورلی
استادیار دانشگاه شهرکرد، رشته اصلاح نباتات و بیوتکنولوژی
بهناز صفار
استادیار دانشگاه شهرکرد، دانشکده علوم گروه ژنتیک
فریبرز خواجعلی
استاد دانشگاه شهرکرد،گروه علوم دام،تغذیه طیور
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :