همسانه سازی و بیان ژن پروتئین پوششی جدایه ایرانی ویروس سوختگی سیاه چغندرقند (BBSV) در باکتری Escherichia coli

سال انتشار: 1398
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 264

نسخه کامل این مقاله ارائه نشده است و در دسترس نمی باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

PPC01_147

تاریخ نمایه سازی: 23 مهر 1398

چکیده مقاله:

ویروس سوختگی سیاه چغندرقند (Beet black scorch virus, BBSV)، در جنس Betanecrovirus از خانواده Tombusviridae طبقه بندی شده است. با توجه به علائم ایجادشده توسط این ویروس شامل سوختگی سیاه روی برگهای گیاهان آلوده و نکروز در ریشه های چغندرقند، بیماری ناشی از این ویروس، سوختگی سیاه چغندرقند (beet black scorch) نام گرفته است. کوتولگی و توقف رشد گیاهان آلوده ازجمله علائم ناشی از آلودگی با این ویروس است. انتقال ویروس سوختگی سیاه چغندرقند در طبیعت به روش ناپایا توسط زئوسپورهای قارچ خاکزی Olpidium brassicae میباشد. وقوع این ویروس در ایران اولین بار در سال 1387 توسط کوئنیگ و ولیزاده از استان خراسان رضوی ومتعاقبا از سایر مناطق ایران گزارش گردید. در این تحقیق ژن پروتئین پوششی یک جدایه ایرانی BBSV که در تحقیقات قبلی از یک بوته چغندرقند از استان خراسان رضوی به دست آمده و تعیین ماهیت شده بود،تکثیر و توالی آن تعیین گردید. این ژن در جدایه موردنظر 699 باز طول داشت که با استفاده از آغازگرهای اختصاصی در ناقل بیانی pET28a(+) همسانه سازی گردید. پلاسمیدهای نوترکیب به باکتری E.coli BL21 انتقال یافت. پرگنه های نوترکیب انتخاب و حضور ژن پروتئین پوششی در آنها به روش آزمون زنجیره ای پلیمراز و نیز تعیین توالی بررسی و تائید شد. بیان ژن پروتئین پوششی نوترکیب (rCP) در پرگنه های نوترکیب با استفاده از روش SDS-PAGE و Western Blot بررسی و تائید شد. نتایج به دست آمده بیان این ژن به وزن تقریبی 24 کیلودالتون را نشان داد. این پروتئین با استفاده از آنتی بادی مرجع اختصاصی BBSV (از کشور آلمان) مورد شناسایی قرار گرفت. این اولین گزارش از همسانه سازی و بیان پروتئین پوششی نوترکیب یک جدایه ایرانیBBSV در سامانه بیان باکتریایی است. این پروتئین به عنوان ایمینوژن در تهیه آنتی بادی اختصاصی علیه BBSV کاربرد دارد.

نویسندگان

شیرین فرزادفر

بخش تحقیقات ویروسهای گیاهی، موسسه تحقیقات گیاهپزشکی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران

رضا پوررحیم

بخش تحقیقات ویروسهای گیاهی، موسسه تحقیقات گیاهپزشکی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران

سیدباقر محمودی

موسسه تحقیقات اصلاح و تهیه بذر چغندرقند، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی