ارزیابی مقایسه ای روش های الایزا ردیابی آنتی ژن و Real time RT-PCR در جستجوی ویروس طاعون نشخوارکنندگان کوچک(PPR)

هدف: طاعون نشخوارکنندگان کوچک یکی از بیماری های ویروسی مهم گوسفند و بز می باشد که در اکثر کشورها از جمله ایران دیده می شود. ویروس آن از جنس موربیلی ویروس ها و از خانواده پارامیکسو ویریده می باشد. روش الایزا ردیابی آنتی ژن از روش های معمول در تشخیص و تشخیص تفریقی PPR و طاعون گاوی می باشد که با استفاده از نمونه های عقده ها ی لنفاوی صلایه شده دام های تلف و یا ذبح شده و نیز خون و سوآب با استفاده از مونوکلونال آنتی بادی طراحی شده جهت ژن نوکلئوپروتئین ویروس PPR صورت می پذیرد . مواد و روش کار: استفاده از روش Real time RT-PCR از دیگر تکنیک های آزمایشگاهی در تشخیص بیماری های ویروسی می باشد . در این روش با استفاده از الیگلونوکلئوتیدهای نشان دار شده با مواد فلورسانس طراحی شده و از ژن نوکلئوپروتئین به صورت Real time RT-PCR یک مرحله ای(one step) انجام گردید. RNA کامل از نمونه های عقده های لنفاوی صلایه شده به روش دستی ویا هموژنایزر و با استفاده از فیلترهای ستونی استخراج و پس از تعیین مقدار و تعیین خلوص با روش های اسپکتروفتومتریک میزان RNA در واکنش بهینه سازی گردید. نتایج و بحث : دراین مطالعه نتایج حاصله از الایزای ردیابی آنتی ژن و Real time مقایسه و میزان هم خوانی بسیار بالایی مشاهده گردید

کلیدواژه ها:

ویروس طاعون نشخوارکنندگان کوچک ، Real time RT-PCR ، الایزا ، ردیابی ، آنتی ژن