سودا جعفری - گروه مهندسی علوم زیستی، دانشکده علوم و فنون نوین دانشگاه تهران
ولی الله بابایی پور - گروه مهندسی بیوشیمی، پژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر
مهدی رهایی جهرمی - گروه بیوشیمی دانشکده داروسازی دانشگاه علوم پزشکی اصفهان
محمدرضا مفید - گروه مهندسی ژنتیک، پژوهشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر

فاکتور رشد انسولین مانند انسانی (hIGF-I) یک پلی پپتید با وزن مولکولی 7649 دالتون است. نقش اصلی این پروتئین در رشد، تکثیر و تمایز سلول است باکتری اشریشیا کلی به دلیل کاربرد آسان، رشد سریع و نیاز به محیط کشت ارزان برای رشد، اغلب به منظور تولید پروتئینهای نوترکیب استفاده می شود. در این تحقیق، ژن hIGF-I در سیستم بیانی pET15b کلون و بصورت انکلوژن بادی در سیتوپلاسم دو سویهی باکتری اشریشیاکلی (OrigamiB و (DE3) BL21) بیان شد. مقایسه میزان بیان در دو سویهی مورد نظر نشان داد که میزان پروتئین hIGF-I در سویهی OrigamiB مناسب تر و در حدود 35% است. به منظور خالص سازی مطلوب پروتئین hIGF-I، تولید پروتئین در شرایط بهینه برای دستیابی به بالاترین میزان پروتئین نوترکیب در کشت غیرمداوم انجام شد و خالص سازی پروتئین به طور موفقیت آمیز توسط ستون ژل فیلتراسیون صورت گرفت.

اشریشیاکلی، IGF-I ، پروتئین نوترکیب، کلون و بیان، خالص سازی