علی علیزاده تیلکی - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران
مصطفی مطلبی - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران
محمد رضا زمانی - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران
زهرا مقدسی جهرمی - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران

پروتئین اسموتین یکی ازاعضای خانواده ی پروتئین های Pathogenesis Related است که اثرات ضدقارچی آن اثبات شده است. دراین مطالعه جهت همسانه سازی ژن اسموتین در وکتور بیانی پروکاریوتی pET26b(+) از سازه pJAA-1 حاوی این ژن استفاده گردید. سازه ژنی حاصل پس از تایید توسط الگوی PCR و هضم آنزیمی و نیز تعیین توالی به نام pTAA-2 نام گذار ی شده و به سوش باکتر یBL21 E. coli منتقل شد. نتایج حاصل از بیان این ژن به روش SDS-PAGE مورد بررسی قرار گرفت. حضور باند پروتئینی تقریبا 25KDa (در محدوده مورد انتظار) نشان دهنده بیان این ژن در سیستم پروکاریوتی مورد استفاده می باشد. نتایج حاصل از بهینه سازی شرایط بیان این پروتئین با استفاده از روش تاگوچی نشان داد که دمای C° 33 ، IPTG با غلظت 0/7 mM ونمونه برداری در 16 ساعت پس از القا بهترین شرایط برای بیان این ژن می باشند. فعالیت ضد قارچی پروتئین بیان شده علیه قارچ های بیماری زا در دست مطالعه می باشد.

اسموتین، مقاومت قارچی، pET26b(+)، بیان هترولوگ، بهینه سازی بیان