همسانه سازی ژن شبه انسولین انسانی در ناقل های بیانی گیاهی
عنوان مقاله: همسانه سازی ژن شبه انسولین انسانی در ناقل های بیانی گیاهی
شناسه ملی مقاله: JR_JOAGK-9-1_002
منتشر شده در شماره 1 دوره 9 فصل در سال 1396
شناسه ملی مقاله: JR_JOAGK-9-1_002
منتشر شده در شماره 1 دوره 9 فصل در سال 1396
مشخصات نویسندگان مقاله:
سرگل دارابی - دانشجوی کارشناسی ارشد، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
سونیا رمضانی - دانشجوی کارشناسی ارشد، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
محمد احمدآبادی - استادیار، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
خلاصه مقاله:
سرگل دارابی - دانشجوی کارشناسی ارشد، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
سونیا رمضانی - دانشجوی کارشناسی ارشد، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
محمد احمدآبادی - استادیار، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
گیاهان تراریخت، بیورآکتورهای مناسبی برای تولید پروتئینهای نوترکیب در سطوح بالا و با کیفیت بهتر میباشند. همسانهسازی ژن کدکننده پروتئین هدف در ناقل بیانی مناسب یکی از مراحل مهم در انتقال و بیان موفق پروتئین در گیاه مورد نظر میباشد. هدف از این تحقیق، همسانهسازی cDNAی فاکتور رشد شبه انسولین-1 (IGF1) در ناقلهای بیانی مناسب گیاهی بود. برای این منظور، ابتدا با استفاده از یک جفت آغازگر اختصاصی، cDNAی ژن IGF1 تکثیر و با استفاده از سایتهای برشی تعبیه شده در ساختار آغازگر در ناقل پایه pMCS5 وارد گردید. با توجه به مزایای غلات بدلیل کشت وسیع، بیوماس بالا، قابلیت ذخیره دانه و قابلیت استفاده خوراکی برای تولید پروتئینهای دارویی، پس از توالییابی، cDNA در یک ناقل مناسب برای انتقال و بیان پروتئین در غلات همسانهسازی گردید. همچنین با توجه به اینکه کلروپلاستهای تراریخت پتانسیل بیشتری برای تولید پروتئین نوترکیب عملکردی در سطوح بالا دارند، cDNAی توالییابی شده در دو ناقل اختصاصی برای انتقال و بیان IGF1 در کلروپلاست توتون نیز همسانهسازی گردید. در یکی از این ناقلها، ژن گزینشگر بوسیله دو توالی مستقیم LoxP احاطه شده تا امکان حذف ژن انتخابگر از طریق سیستم Cre/Lox پس از گزینش گیاهان تراریخت فراهم گردد.
کلمات کلیدی: فاکتور رشد شبه انسولین-1, همسانه سازی, انتقال ژن, پروتئین نوترکیب, ناقل بیانی
صفحه اختصاصی مقاله و دریافت فایل کامل: https://civilica.com/doc/864879/