مقایسه دو روش خالص سازی بتا توکسین کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ B

کلستریدیوم پرفرنژنس یک باکتری بی هوازی است که از بین سویه های آن فقط تیپ B و C می توانند بتا توکسین را تولید کنند. بتا توکسین نقش مهمی در بسیاری از بیماری های انسان و حیوان دارد و تاثیر مهلکی بر روده می گذارد. مطالعه ی حاضر با هدف مقایسه دو روش خالص سازی برای استخراج بتا توکسین از کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ B انجام شد. به عنوان روش اول، بتا توکسین با استفاده از رسوب سولفات آمونیوم، کروماتوگرافی ستونی (سفادکس G-۲۵) و کروماتوگرافی تعویض یونی خالص سازی شد، در حالی که در روش دوم از کروماتوگرافی افینیتی استفاده شد. فعالیت همولیزی و مقدار پروتئین در هر مرحله از خالص سازی اندازه گیری شد. خلوص بتا توکسین در هر مرحله با استفاده از الکتروفورز ((SDS-PAGE بررسی شد. با توجه به نتایج مقایسه این دو روش نشان داد که بازده روش اول ۸/۸۲ درصد و بازده روش دوم ۱/۹۰ درصد بود. مقادیر فعالیت ویژه برای روش اول و دوم به ترتیب  U/mg۱/۲۳۶۸ و U/mg ۵/۱۶۴ محاسبه شد. نتایج ما نشان می دهد که کروماتوگرافی افینیتی می تواند برای خالص سازی بتا توکسین از کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ B با خلوص بالا و نسبت فعالیت به پروتئین (HU/mg ۴۳۷۰) استفاده شود.

کلیدواژه ها:

کلستریدیوم پرفرنژنس تیپ B ، بتا توکسین ، کروماتوگرافی تعویض یونی ، کروماتوگرافی افینیتی