Detection of Clostridium difficile associated diarrhea in disease based on Polymerase chain reaction and bacterial culture And toxin A, B frequency

زمینه و هدف: کلستریدیوم دیفیسیل باسیل گرم مثبت، بی هوازی اجباری است. تشخیص دقیق و سریع یکی از مسائل مهم در کنترل عفونت کلستریدیوم دیفیسیل است. مطالعه حاضر باهدف مقایسه دو روش کشت و واکنش زنجیره ای پلیمراز در تشخیص کلستریدیوم دیفیسیل از بیماران مبتلابه اسهال و بررسی توکسین های A و B در این نمونه ها است. مواد و روش ها: ۶۸ نمونه از بیماران بستری در بیمارستان های قم جمع آوری گردید. همه نمونه­ها به سرعت روی محیط CCFA کشت و در شرایط بی هوازی گرما گذاری شدند. پس ازاین اقدامات، باکتری های موردنظر جهت استخراج DNA و سپس انجام PCR بر روی ژن  cdd۳جهت تشخیص قطعی باکتری به کار گرفته شد؛ محصول PCR آن ۶۲۲bp است و برای توکسین های A و B بایستی قطعاتی با طول ۴۷۳ و ۲۷۲ جفت باز گرفته شود. نتایج: مورفولوژی پرگنه ­های کلستریدیوم دیفیسیل بر روی محیط­های مختلف بسیار متفاوت است. از مجموع ۶۸ نمونه مدفوع استفاده شده، ۱۱ کشت مثبت به دست آمد. ۱۶ ایزوله کلستریدیوم دیفیسیل ازنظر ژن cdd۳ مثبت بودند که در ۶ مورد دارای هر دو توکسین و ۴ مورد دارای توکسین A و ۳ مورد توکسین B را برای اساس ژن های مورد انتظار دارا بودند. نتیجه گیری: روش سیتوتوکسیتی به عنوان روش gold standard برای این باکتری است. به منظور پیشگیری از شیوع بالای این باکتری، استفاده از روش های شناسایی بسیار مهم است که تکنیک PCR در مقایسه با روش های کشت روشی مناسب برای تشخیص سریع باکتری کلستریدیوم دیفیسیل است این روش در زمان کمتری انجام شده و همچنین از اختصاصیت بالایی برخورداراست.

کلیدواژه ها:

diarrhea ، PCR ، ccd۳ gene ، Clostridium difficile ، toxin A ، B ، اسهال ، PCR ، ژن cdd۳ ، کلستریدیوم دیفیسیل ، توکسین A و B