THE GENE CLONING, OVEREXPRESSION, PURIFICATION, AND CHARACTERIZATION OF DIBENZOTHIOPHENE MONOOXYGENASE AND DESULFINASE FROM GORDONIA ALKANIVORANS RIPI۹۰A
محل انتشار: مجله علوم و فن آوری نفت، دوره: 3، شماره: 2
سال انتشار: 1392
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: انگلیسی
مشاهده: 52
فایل این مقاله در 8 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JPSTR-3-2_007
تاریخ نمایه سازی: 29 آذر 1402
چکیده مقاله:
The biodesulfurization (BDS) of sulfur compounds in fossil fuels is a process to reduce sulfur dioxide emissions that cause environmental pollution. Gordonia alkanivorans RIPI۹۰A is able to convert dibenzothiophene, an organic sulfur compound in petroleum, to ۲-hydroxybiphenyl (۲-HBP) in ۴S pathway. In this study, (DBT), DszA and DszB, DBT sulfone monooxygenase, and desulfinase were respectively isolated from G. alkanivorans RIPI۹۰A. PCR amplified fragments were obtained by using primers designed based on known sequences from G. alkanivorans RIPI۹۰A. They are identified as dszA and dszB and have shown high similarity compared to Rhodococcus erythropolis IGTS۸ (۸۸% for dszA and ۸۸% for dszB). Subsequently, dszA and dszB genes were expressed under the control of T۷ promoter in Escherichia coli. The recombinant proteins were purified to achieve homogeneity using Ni-agarose column chromatography. The molecular mass of the purified DszA and DszB were determined to be ۵۱.۹ and ۳۹.۲ kDa respectively by using SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. DszA showed a Km of ۰.۱۴±۰.۰۰۵ mM and a maximal velocity of ۰.۰۰۴±۰.۰۰۰۴ mM/min. DszB showed a wide substrate range in a way that all aromatic sulfonates compounds acted as its substrate; as it seemed the active site was suitable for the sulfonated aromatic rings. The Km and Vmax values of DszB were calculated to be ۱.۸۱±۰.۰۲ mM and ۶.۵۵ ± ۰.۰۰۵ µM/min respectively using ۴-Amino-۳-hydroxy-naphthalene-sulfonic acid as a substrate
کلیدواژه ها:
نویسندگان
Mahmoud Shavandi
Microbiology and Biotechnology group, RIPI
Majid Soheili
Microbiology and Biotechnology group, RIPI
Shokufeh Zareian
Faculty of Biological science, Tarbiat Modares university
Neda Akbari
Faculty of Biological science, Tarbiat Modares university
Khosro Khajeh
Faculty of Biological science, Tarbiat Modares university
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :