بررسی ویژگیهای بیولوژیکی و مولکولی سه سویه ویروس تریستزای مرکبات در استان مازندران

ویروس تریستزا از بیماریهای مهم در مرکبات میباشد. در این تحقیق پراکنش ویروس تریستزای مرکبات در نهالستان های استان مازندران با تکنیک ایمیونوپرینت (DTPIA) در سال 1391 انجام شد، سه سویه های منتخب از نظر ویژگی های بیولوژیکی و مولکولی بررسی شدند. سپس گیاهان محک کی لایم، نارنج، گریتفروت و پایناپل با استفاده از پیوند پوستک از نهال های انشوی آلوده، نمونه برداری شده آلوده سازی شد و در شرایط گلخانه ای (روز 18، شب 21) درجه سانتیگراد نگهداری شدند. علائم زردی رگبرگ و فنجانی شدن برگ پس از یک ماه و ساقه آبله ای پس از سه ماه در کی لایم مشاهده گردید. در گریپ فروت پس از ده هفته علائم زردی گیاهچه و پس از چهار ماه ساقه آبله ای ایجاد شد. در نارنج پس از چهار ماه فقط علائم زردی گیاهچه مشاهده گردید و پایناپل علائمی را نشان نداد. به طور کل سویه های بررسی شده در گروه ساقه آبله ای و زردی گیاهچه قرار گرفتند. به منظور تعیین خصوصیات مولکولی، استخراج RNA از رگبرگ اصلی و پوست گیاهچه های کی لایم آلوده. توسط کیت RNeasy (شرکت کیاژن) انجام شد و ژن CP25 سویه ها توسط پرایمرهای (L28,U28 و -,+T36cp) با تکنیک RT-PCR تکثیر داده شد. توالی سویه های مذکور با توالی ویروس تریستزای موجود در بانک ژن مورد مقایسه قرار گرفت.

کلیدواژه ها:

تریستزا ، ایمیونوپرینت ، کی لایم ، Sequencing ، RT-PCR