ایجاد ارقام گلابی سالم و عاری از ویروس و بیماری

این تحقیق با هدف کلی دستیابی به گیاهان اولیه سالم برای تکثیر، احداث باغ مادری و در نهایت تولید نهال سالمصورت پذیرفت. به این منظور ابتدا از پنج رقم گلابی با نامهای ابته فتل، درگزی، کوشیا، ، ملینا و اسپادونا نمونه گیری0 میلی گرم در لیتر / با افزودن 5 MS انجام شد. این نمونه ها بعد از ضدعفونی، به محیط استقرار: محیط کشت پایهبنزیل آمینوپورین(، انتقال یافتند. پس از استقرار، آزمایشهایی جهت بهینه کردن محیط تکثیر این ارقام انجام (BAPگرفت. نتایج این آزمایش نشان داد در مجموع صفات کمی و کیفی پرآوری، برای هفت رقم گلابی مورد مطالعه، درمناسب تر از دیگر تیمارها بوده است، بنابراین )BAP 1mg/l + Actiwave 300μl + Viva 300μl( T تیمار 7در ادامه آزمایش، این تیمار هورمونی به عنوان محیط بهینه، جهت تکثیر ریزنمونه ها مورد استفاده قرار گرفت.در بخشبا تکنیک ،(ACLS, ASG, ASP) مطالعات سالم سازی، ابتدا آلودگی گیاهان مادری به سه ویروس مورد مطالعهبررسی شد، و در این مرحله مشخص شد که به جز ارقام ابته فتل و بیروتی که RT-PCR سرولوژیکی الایزا و ملکولیآلودگی نداشتند، تمامی نمونه ها به هر سه نوع ویروس آلوده بودند. برای عاری نمودن ریزنمونه ها از ASP به ویروس، ویروس، گیاهچه های درون شیشه، مورد آزمون چند رژیم زمانی گرما درمانی در دمای 38 درجه و برای مدت صفر، 70 میلیمتر، بین / 14 و 21 روز قرار گرفتند. سپس مریستم انتهایی از گیاهان گرما دیده در سه طول مختلف )کوچکتر از 20 میلیمتر( جدا شد. پس از رشد مریستمها و تشکیل ریزنمونه قابل تکثر از آنها، آزمون / 0 میلیمتر و بزرگتر از 7 / 0/2 تا 7برای ویروسهای مورد مطالعه انجام شد. نتایج نشان داد، رابطهای مستقیم بین افزایش RT-PCR سرولوژیکی الایزا وطول دورهی گرمادرمانی و عاری شدن نمونه ها از ویروس وجود دارد، از طرفی هر چه سایز مریستم برداشته شدهکوچکتر باشد، احتمال عاری شدن نمونه از ویروس نیز افزایش می یابد. واکنش ارقام مورد مطالعه، به تیمارهای حذفویروس متفاوت بود، به طوریکه بیشترین میزان عاری شدن از ویروس در رقم کوشیا و کمترین آن در رقم اسپادوناراحت تر ASP مشاهده شد. علاوه بر این میزان حساسیت ویروس ها به تیمارهای حذف ویروس متفاوت بود، ویروساز دیگر ویروسها از گیاهان آلوده حذف شد. در پایان آزمایش ها، نمونه هایی که با استفاده از هر دو روش غربالگریسالم تشخیص داده شدند، تکثیر و ریشه دار شده و به گلدان منتقل شدند تا جهت احداث باغ ،RT-PCR الایزا ومادری سالم مورد استفاده قرار گیرند.واژه های کلیدی: کشت مریستم ، سالم سازی، عاری از ویروس ، گرما درمانی، گلابی