ارزیابی اثر ترکیب اکسید گرافن-گلد بر روی رده سلولی HepG۲

سابقه و هدف: یکی از مهم ترین تاثیرات نانو مواد بر سلول ها، القای فرآیند مرگ برنامه ریزی شده سلولی (آپوپتوز) می باشد. هدف از این مطالعه، بررسی اثر سمیت نانو ذره اکسید گرافن-طلا و ارزیابی بیان ژن کاسپاز ۳ در رده سلول های سرطانی کبد HepG۲ می باشد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی رده سلولی هپاتو سلولار کارسینوما (HepG۲) از انستیتو پاستور تهران تهیه شد .از سلول های تیمار شده با غلظت های µg/ml ۱۰ تا ۵۰۰ از Gold-rGO و تیمار نشده به عنوان کنترل استفاده گردید. میزان بیان ژن کاسپاز ۳ و میزان زنده مانی سلول ها در سه گروه کنترل C، گروه A و B در زمان های ۲۴ و ۴۸ ساعت بررسی و مقایسه شد. اثر غلظت به روش XTT و رنگ آمیزی آکریدین اورنج اتیدیوم بروماید بررسی شد. سنجش بیان ژن کاسپاز ۳ به صورت کمی Relative quantification با استفاده از تست Real time PCR انجام شد. یافته ها: بر اساس نتایج XTT مقادیر EC۲۰، EC۵۰، EC۸۰ در زمان ۲۴ ساعت به ترتیب µg/ml ۳۸۶/۴۲۰، ۹۰/۶۸۰، ۲۴/۱۵۱ و در زمان ۴۸ ساعت g/mlµ ۳۵۸/۱۴۶، ۸۹/۵۳۶، ۲۲/۳۸۴ محاسبه شد. بررسی میزان تغییر سطح بیان ژن کاسپاز ۳ در این غلظت ها در مقایسه با سلول های تیمار نشده در زمان های ۲۴، ۱/۰۲۲±۳/۴۳۶Difference between means fold change±SEM=  و ۴۸ ساعت ۰/۰۲±۴/۰۵۴ نشان داد که به صورت معنی داری میزان سطح بیان ژن تغییر می کند. میزان زنده ماندن سلول های کنترل (C) در مقایسه با سلول های تیمار شده با غلظت های بالاتر از ۵۰ میکروگرم در میلی لیتر (B) افزایش نسبی دارد که از لحاظ آماری معنی دار است (۰/۰۰۰۱>p). بررسی با رنگ آمیزی AO/EB برای تعیین میزان آپوپتوز با بیشتر شدن دوز میزان آپوپتوز بیشتری را نشان داد. نتیجه گیری: نتایج مطالعه نشان داد که در کاربرد این نانو ذره باید از زمان های کوتاه تر و غلظت های پایین تر استفاده کرد.

کلیدواژه ها:

Cytotoxicity ، Biocompatibility ، Graphene ، Gold-Graphene ، Caspase ۳. ، سمیت سلولی ، زیست سازگاری ، گرافن ، گلد-گرافن ، کاسپاز ۳.