بررسی بیان miRNAهای محیط کشت جنین های انسانی با کروموزوم های جنسی طبیعی و جنین های با یک کروموزوم جنسی X (سندرم ترنر)

مقدمه: روش های کمک باروری و آزمایش ژنتیکی پیش از لانه گزینی (PGT) برای تشخیص آنوپلوئیدی، به منظور دستیابی به تولد نوزاد یوپلوئید و در زوجین نابارور یا کم بارور انجام می شود. miRNAها مولکول های RNA غیر رمزگذار تک رشته ای و مهم تنظیم کننده پس از رونویسی بیان ژن در فرایندهای مختلف بیولوژیکی و فیزیولوژیکی هستند. هدف این مطالعه بررسی برخی miRNAهای ترشح شده در محیط های کشت جنینهای انسان (به عنوان نشانگرهای زیستی تشخیصی) و ارتباط آن با میزان آنوپلوئیدی جنین و نتایج روش های کمک باروری است. مواد و روش­ها: چرخه های PGT حاصل از تزریق درون سیتوپلاسمی اسپرم (از فروردین سال ۱۴۰۱ تا خرداد سال ۱۴۰۱) با استفاده از مکمل سازی فلورسانس درجا Fluorescence in situ hybridization (FISH) ارزیابی شد. در ادامه، محیط کشت سه جنین یوپلوئید و سه جنین آنیوپلوئید با یک کروموزوم جنسی X (ترنر) جمع آوری گردید و بیان miRNA hsa-miR-۱۹۹a-۵p, hsa-miR-۱۹۹b-۳p, hsa-miR-۳۷۹-۵p, hsa-miR-۴۸۳-۵p, hsa-miR-۹۹a-۵p, hsa-miR-۴۳۲-۵p با استفاده از RT-qPCR بررسی شد. یافته­ های پژوهش: در محیط کشت جنین های یوپلوئید، افزایش معنی دار میزان بیان سه miRNA شامل hsa-miR-۳۷۹-۵p, hsa-miR-۱۹۹a-۵p, hsa-miR-۱۹۹b-۳p و کاهش بیان سه miRNA شامل hsa-miR-۴۳۲-۵p, hsa-miR-۴۸۳-۵p, hsa-miR-۹۹a-۵p با اختلاف معنی دار   P<۰.۰۰۱مشاهده گردید. بیان این miRNAها در محیط کشت جنین های ترنر با الگو کاملا عکس بود. بحث و نتیجه گیری: در بررسی میزان بیان miRNAهای بررسی شده در این طرح، افزایش بیان سه miRNA و کاهش بیان سه miRNA دیگر در جنین های یوپلوئید با الگو، بیان عکس همین miRNAها در جنین های ترنر را نشان داد. این نتایج می تواند نویدبخش باشد و برای استفاده از روش های غیرتهاجمی به جای بیوپسی جنین در بررسی های تشخیصی تعداد کروموزوم های جنسی مورد توجه قرار گیرد.

کلیدواژه ها:

Fluorescence in Situ Hybridization (FISH) ، Genetic Testing ، miRNA ، Intracytoplasmic Sperm Injection ، Preimplantation Spent Blastocyst Medium ، تزریق داخل سیتوپلاسمی اسپرم ، هیبریداسیون فلورسنت درجا (FISH) ، آزمایش ژنتیکی پیش از لانه گزینی ، miRNA ، محیط کشت بلاستوسیست