بررسی تنوع ژنتیکی carpophilus Wilsonomyces عامل لکه غربالی هسته داران در استان خراسان رضوی با استفاده از نشانگر PCR-rep

بیماری لکه غربالی درختان میوه هستهدار ناشی ازcarpophilus Wilsonomyces باعث ضعیف شدن درختان آلوده و کاهش کمیت و کیفیت محصول در اغلب مناطق جهان میشود. این تحقیق به منظور بررسی تنوع ژنتیکی این قارچ در استان خراسانرضوی با استفاده از نشانگر مولکولی PCR-rep انجام شد. از باغات هلو، شلیل، آلو، زردآلو و گیلاس شهرستانهای قوچان، طرقبه-شاندیز، چناران، نیشابور، کلات، تربتحیدریه و مشهد نمونهبرداری شد. برگها، سرشاخهها و میوههای آلوده به آزمایشگاه منتقل شدند. قطعاتی از حد-فاصل بافت آلوده و سالم جدا و پس از ضدعفونی سطحی در تشتکهای پتری حاوی محیط کشت های PDA ،مالتآگار و آبآگار کشت و در انکوباتور با دماهای 18 ،20 و 25 درجه سانتیگراد قرارگرفتند. قارچهای جداشده پس از خالصسازی شناسایی شدند. تنوع ژنتیکی 20جدایه قارچی جداسازیشده از درختان میوه هستهدار شهرستانهای مختلف استان تعیین شد. تکثیر DNA ژنومی با استفاده آغازگرهای A1R BOX ،ERIC2 ،ERIC1R ،I-REP2 و I-REP1R صورت گرفت. درمجموع 39 باند در محدوده 100 تا 5000 جفتباز تشکیل شد که از این تعداد 38 باند چند شکلی را نشان دادند. ماتریکس تشابه بین جدایهها بر اساس ضریب جاکارد محاسبه و تجزیه کلاستر و رسم دندروگرام بر اساس UPGMA با استفاده از نرم افزار 0.PC2.NTSYS انجام شد. نتایج نشان داد که جدایهها در سطح تشابه 69 درصد به 12 دودمان کلونی تقسیم شدند. با این نشانگر جدایه های قارچی شهرستانهای کلات و چناران از نظر جغرافیایی و تا حدودی جدایههای قارچی آلو از نظر میزبانی از سایر جدایههای قارچی جدا شدند. همچنین با این نشانگر اکثر جدایههای قارچی زردآلو از سایر گروهها جدا شدند.

کلیدواژه ها:

بیماری لکه غربالی ، نشانگر مولکولی