بررسی میزان بیان ژن‌GPR83 سلول‌های AGS ترانسفکت شده با وکتور نوترکیب pFLAG-CMV-3-tagD

سابقه و هدف: عفونت هلیکوباکترپیلوری از عوامل اصلی ایجاد­کننده سرطان معده در انسان است. ژن tagD هلیکوباکترپیلوری که کد کننده آنزیم تیول پروکسیداز است، نقش مهمی در کلونیزه­شدن باکتری در جدار معده انسان ایفا می­کند. تحقیقات نشان داده است که ژن GPR83 در سرطان معده افزایش بیان دارند و هدف از این تحقیق بررسی میزان بیان ژن­ GPR83، در ﺳﻠﻮل­های ﺳﺮﻃﺎﻧﻲ آدﻧﻮﻛﺎرﺳﻴﻨﻮﻣﺎی ﻣﻌﺪه (adenocarcinoma gastric cell line[S1]  یا (AGS[M2]  ترانسفکت شده با وکتور نوترکیب pFLAG-CMV-3-tagD به­روش Real Time PCR[M3]  است. مواد و روش­ها: سلول­های AGS به کمک محلول لیپوفکتامین و با پلاسمید حامل ژن کد کننده tagD هلیکوباکتر پیلوری یا پلاسمید خالی (کنترل)، ترانسفکت شدند. سپس استخراج RNA از سلول­های کشت داده شده انجام شد و سنتز cDNA صورت پذیرفت و سپس بیان یوکاریوتی ژن tagD[M4]  هلیکوباکترپیلوری در سلول­های AGS با روش RT-PCR بررسی شد. میزان بیان ژن­های GPR83، با روش Real Time PCR ارزیابی گردید. لازم­به ذکر است که برای بررسی آپوپتوز از کیت انکسین استفاده شد و در نهایت با استفاده از نرم­افزار  SPSSو آزمون­های آماری t-test Indepent  بیان هر یک از ژن­ها بررسی شد. یافته­ ها: یافته­های به­ دست آمده از آنالیز بیان ژن نشان داد که بیان ژن GPR83 در سلول­های AGS تیمار شده با tagD نسبت­به سلول­های کنترل افزایش بیان داشت اما این افزایش بیان از لحاظ آماری معنی­دار نبود (P= 0.0888).   نتیجه­ گیری: به­ طور کلی، داده­های به­ دست آمده از این تحقیق حاکی از آن بود که بیان ژن­ GPR83 در سلول­های تحت تیمار با ژن tagD هلیکوباکترپیلوری[M5] ، تغییر می­یابد و به­نظر می­رسد که ژن GPR83 هلیکوباکترپیلوری در ایجاد این تغییر بیان نقش دارد.

کلیدواژه ها:

Helicobacter pylori ، tagD ، GPR83 ، AGS ، IAU science. ، هلیکوباکترپیلوری ، tagD ، GPR83 ، AGS ، IAU science