بیان هترولوگ ژن پروتئین پوششی ویروس موزائیک گل کلم در E. coli و تشکیل ذرات شبه ویروسی
سال انتشار: 1402
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 143
فایل این مقاله در 11 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_ARPP-12-1_010
تاریخ نمایه سازی: 1 مرداد 1402
چکیده مقاله:
ویروس موزائیک گل کلم (Cauliflower Mosaic Virus= CaMV)نخستین ویروس گیاهی شناسایی شده دارای ژنوم DNA است که خسارت اقتصادی زیادی به گیاهان خانواده Brassicaceae وارد میکند. تولید موفق کپسیدهای این ویروس هم در تشخیص سرولوژیکی آن و هم در تشکیل ذرات شبه ویروسی Virus-Like Particles = VLPs مفید است. در این تحقیق، DNA نمونههای گل کلم دارای علایم مشکوک به ویروس، استخراج و ژن پروتئین پوششی (Coat protein= CP) ویروس توسط آغازگرهای اختصاصی در PCR تکثیر شد. سپس توسط آنزیمهای برشی BamHI و SmaI در وکتور بیانی pGEX۲TKدر پایین دست GST وارد و بعد از تایید وکتور نوترکیب، توالییابی انجام شد و توالی بدست آمده در پایگاه داده NCBI با برنامه BLASTn با توالیهای موجود در بانک ژن مقایسه شد و مشخص گردید که این توالی مربوط به ویروس CaMV با شماره دسترسی KF۳۵۷۵۹۰.۱ در پایگاه NCBI است. بیان پروتئین CP در باکتری E. coli سویه Rosetta القاء و بهینهسازی شد. بیان بسیار بالای این پروتئین در دمای ۳۷ درجه سانتیگراد و شش ساعت پس از القا به کمک IPTG با غلظت نهایی ۱mM بدست آمد. سپس این پروتئین با نانوذرات سفاروز که توانایی اتصال به GST را دارند خالصسازی و در SDS-PAGE مشاهده شد. پروتئینهای خالص شده CP با میکروسکوپ الکترونی بررسی شد و ذرات شبه ویروسی (VLPs) مشاهده گردید. تصاویر مربوط به میکروسکوپ الکترونی تولید VLPs این ویروس را بدون ایجاد اینکلوژن بادی و با مونتاژ صحیح تائید میکند که میتواند در حمل دارو در پزشکی مورد آزمایش قرار گیرد.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
مهین پوراسمعیل
گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
مقصود پژوهنده
گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
اکبر شیرزاد
گروه گیاهپزشکی دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان
احمد یاری خسروشاهی
نانوفناوری پزشکی. گروه نانوتکنولوژی پزشکی، دانشکده علوم نوین پزشکی. مرکز تحقیقات علوم کاربردی دارویی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز. ایران
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :