بررسی و خالصسازی نسبی آنزیم (های) مؤثر در احیای تلوریت از باکتری نمک دوست Salinicoccus iranensis
سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 249
فایل این مقاله در 20 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_BJM-3-11_002
تاریخ نمایه سازی: 4 بهمن 1399
چکیده مقاله:
مقدمه: امروزه استفاده بیش از حد از تلوریت، محیط را متحمل اثرات سمی ناشی از این اکسیآنیون کرده است. از این رو تیمار زیستی مناطق آلوده، به عنوان روشی ارزان و سازگار با محیط زیست، مطرح است. اگرچه اثرات سمی تلوریت برای بیشتر میکروارگانیسمها گزارش شده ولی گونههای مختلفی از باکتریها، از جمله باکتری نمک دوست مورد استفاده در این پروژه میتواند بر سمیت آن با احیای این اکسیآنیون به شکل عنصریش غلبه کند. هدف این مطالعه، شناسایی مسیر آنزیمی به سمزدایی تلوریت بود. مواد و روشها: در ابتدا به منظور بالا بردن فعالیت آنزیمی و از دست ندادن آن طی فرآیند خالصسازی، بهینهسازی آزمون مناسب برای بررسی فعالیت آنزیمی و شرایط تولید آن انجام شد. بهینهسازی با "روش یک عامل در هر زمان" انجام شد. عاملهای مختلفی از جمله: زمان، درصدهای مختلف مایهتلقیح، اسیدیته، غلظتهای مختلف تلوریت و نمکهای مختلف بهینه شد. بهمنظور اطمینان در طی پژوهش میزان حذف تلوریت نیز بررسی شد. خالصسازی آنزیم مورد نظر با روشهای مختلف مانند، رسوب با آمونیوم سولفات[i] و کروماتوگرافی ستونی میانکنش هیدروفوب[ii] با غلظت 4/1 مولار اشباع آمونیوم سولفات انجام شد. خلوص آنزیم در طی هر مرحله با SDS-PAGE بررسی شد. نتایج: شرایط بهینه بهدست آمده نشان داد که در زمان 30 ساعت، 3 درصد مایهتلقیح، اسیدیته 5/7، بدون حضور تلوریت و در 5 درصد نمک NaCl، بالاترین میزان فعالیت آنزیم و حذف تلوریت مشاهده میشود. خالصسازی آنزیم به میزان زیادی پروتئینهای غیرمرتبط را کاهش داد و تغلیظ یکی از باندها که زیرواحدی از آنزیم مورد هدف بود، را باعث شد. در بخش پروتئینی به طور نسبی خالصشده، نشان داده شد که علاوه بر فعالیت تلوریت ردوکتازی، فعالیت سلنیت و نیترات ردوکتازی نیز در این بخش وجود دارد. بحث و نتیجهگیری: این پژوهش، در مسیر شناسایی بیشتر فیزیولوژی میکروارگانیسمهای هالوفیل و بررسی آنزیم دخیل در احیای تلوریت گام برداشته و آنزیم مسوول را در باکتری مربوطه بهینه و تا حدی خالصسازی کرده است.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
ثنا علوی
کارشناس ارشد میکروبیولوژی، دانشگاه تهران، ایران
محمدعلی آموزگار
دانشیار میکروبیولوژی، دانشگاه تهران، ایران
خسرو خواجه
استاد بیوشیمی، دانشگاه تربیت مدرس، ایران
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :