بررسی تولید آنزیم پروتئاز قلیایی توسط مخمر یاروویا لیپولیتیکا با استفاده از محیط کشت‏ های مختلف

مقدمه: پروتئاز‏های قلیایی از مهم‏ترین آنزیم‏های صنعتی محسوب می‏شوند و با توجه به کاربرد‏های فراوانی که در حذف آلاینده‏های محیطی و پیشبرد فرآیند‏های صنعتی دارند، مورد توجه پژوهشگران‏ بسیاری قرار گرفته‏اند. هدف از این پژوهش، جداسازی و شناسایی مخمر بومی مولد آنزیم پروتئاز قلیایی و تعیین فعالیت آنزیم در این جدایه است. ‏‏‏ مواد و روش‏‏ها: نمونه‏گیری ‏از خاک، آب و پساب کارخانه‏های مختلف انجام شد. به منظور غربال‏گری ‏گونه‏های مولد آنزیم پروتئاز قلیایی در ابتدا از محیط کشت پپتون آگار با اسیدیته قلیایی و محیط کشت میلک آگار استفاده شد. در مرحله بعد سنجش آنزیم با روش لوری انجام و اثر محیط کشت‏های مختلف در تولید آنزیم پروتئاز قلیایی بررسی شد. برای شناسایی بهترین گونه مولد، DNA جدایه استخراج و PCR انجام شد. ‏‏‏ نتایج: از بین تمام جدایه‏ها، ۲۷ جدایه مولد آنزیم پروتئاز قلیایی بودند و جدایه‏ای که بیش‏ترین تولید آنزیم پروتئاز قلیایی معادل ۵۲۵ ‏(‏واحد/ میلی‏لیتر) را داشت برای مراحل بعدی انتخاب شد. بیشینه تولید آنزیم پروتئاز قلیایی در محیط کشت YPG براث مشاهده شد. مقایسه توالی ۱۸s rDNA مخمر جدا شده با توالی‏های موجود در پایگاه اطلاعات ژنومی حداکثر شباهت جدایه را با گونه یاروویا لیپولیتیکا نشان داد. ‏‏‏ بحث و نتیجه گیری: با توجه به کاربرد‏های فراوان این آنزیم در صنعت و تولید نشدن آن در کشور، به نظر می‏رسد استفاده از سویه‏های محلی می‏تواند در دستیابی به تولید بالای آنزیم پروتئاز قلیایی مفید واقع شود. همچنین، با توجه به غیر بیماری‏زا بودن سویه معرفی شده و تولید بالای آنزیم می‏توان این سویه را به عنوان سویه صنعتی مناسب معرفی کرد. ‏‏‏

کلیدواژه ها:

پروتئاز قلیایی ، پپتون آگار ، میلک آگار ، یاروویا لیپولیتیکا