خالص سازی و تعیین ویژگی های بیوشیمیایی آنزیم گلوتاتیون اس- ترنسفراز از پسیل معمولی پسته (Agonoscena pistaciae Burckhardt and Lauterer (Hemiptera: Psyllidae
محل انتشار: نامه انجمن حشره شناسی ایران، دوره: 38، شماره: 4
سال انتشار: 1397
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 201
فایل این مقاله در 13 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JESI-38-4_005
تاریخ نمایه سازی: 18 دی 1401
چکیده مقاله:
آنزیم گلوتاتیون اس- ترنسفراز (GST) از حشرات بالغ پسیل پسته، Agonoscena pistaciae Burckhardt and Lauterer به واسطه رسوب گذاری سولفات آمونیوم و کروماتوگرافی میل ترکیبی با بکارگیری ستون Glutathione Sepharose ۴B جداسازی و خالص شد. آنزیم خالص شده بصورت تک باند درSDS-PAGE ظاهر شد و وزن مولکولی آنزیم ۴/۲۸ کیلو دالتون تخمین زده شد. آنزیم از پسیل پسته به صورت ۲۷/۳۹ برابر و با درصد بازیابی ۳۷/۱۲ خالص سازی شد و آنزیم خالص شده، فعالیت ویژه ۰۸/۳۰ U mg-۱ protein نشان داد. دما و pH بهینه فعالیت آنزیم به ترتیب ۳۰ درجه سلسیوس و ۹ به دست آمد. مقادیر Km و Kcat برای سوبسترای GSH (Glutathione) به ترتیب ۴۴/۰ mM و ۹/۱۵۲ s−۱ محاسبه شد و برای سوبسترای CDNB (۱-chloro-۲,۴-dinitrobenzene) ۳۳/۰ mM و ۷/۲۰۷ s−۱ به دست آمد. فعالیت آنزیم GST به طور کامل با اضافه کردن EDTA، ZnCl۲ و SDSمتوقف شد، این در حالی است که CaCl۲، BaCl۲، CoCl۲، Hg۲Cl۲، MgCl۲،Urea، MnCl۲ وKCl به طور جزئی فعالیت آنزیم را متوقف کرد. مطالعات بازدارندگی in vitro نشان داد که تمام آفت کش های شیمیایی (از جمله: ایمیداکلوپرید، استامی پراید، فوزالون و آمیتراز) بر فعالیت آنزیم خالص شده GST اثر بازدارندگی دارند. نتایج مطالعه ما با گسترش اطلاعات بیوشیمیایی آنزیم GST حاصل از پسیل معمولی پسته، به درک مکانیسم های مقاومت در این آفت کلیدی کمک می کند.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
سیما زندوکیلی
گروه گیاه پزشکی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان، رشت، ایران
نرگس معماری زاده
بخش تحقیقات آفت کش ها، موسسه تحقیقات گیاهپزشکی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران
محمد قدمیاری
گروه گیاه پزشکی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان، رشت، ایران
علی علیزاده
گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه ولی عصر رفسنجان
رضا حسن ساجدی
گروه بیوشیمی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :