مقایسه میزان بیان آلکالین فسفاتاز، ژن Gfra۱، Lin۲۸ و Sall۴ در سلول های بنیادی جنینی، سلول های بنیادی اسپرم ساز و سلول های شبه بنیادی جنینی در موش

سابقه و هدف: اسپرماتوژنز یک فرآیند سازمان یافته است که فاکتورهای فراوانی بر کنترل و تنظیم آن اثرگذار هستند. آلکالین فسفاتاز به همراه ژن های Gfra۱، Lin۲۸ و Sall۴ از جمله فاکتورهای اصلی دخیل در این فرآیند هستند که با یکدیگر در ارتباط هستند. هدف از انجام این مطالعه بررسی و مقایسه میزان بیان آنزیم آلکالین فسفاتاز و همچنین ژن های Gfra۱، Lin۲۸ و Sall۴ در سلول های بنیادی جنینی، اسپرم ساز، و شبه جنینی در موش می باشد. مواد و روش ها: ابتدا سلول های بنیادی اسپرم ساز جداسازی شدند و سپس سلول های بنیادی جنینی موش و سلول های ES-like تهیه شدند. در مرحله بعدی سنجش بیان آلکالین فسفاتاز با استفاده از رنگ آمیزی آلکالین فسفاتاز بررسی شد. سپس بررسی بیوانفورماتیکی ژن های دارای ارتباط مستقیم انجام شد و برای سنجش بیان ژن های Gfra۱، Lin۲۸ و Sall۴ از Fluidigm PCR و همچنین از ایمونوهیستوشیمی، برای بیان Gfra۱، استفاده شد. یافته ها: ژن های Gfra۱، Lin۲۸ و Sall۴ بیان مثبت و معنی دار (۰/۰۵P<) در سلول های بنیادی پرتوان و سلول های جنسی داشتند. آلکالین فسفاتاز نیز دارای بیان مثبت در سلول های بنیادی جنسی و سلول های بنیادی پرتوان بود و در سلول های سرتولی و فیبروبلاست ها بیان کم و منفی داشت، که نشان از اختصاصی بودن این آنزیم در این رده های سلولی دارد. استنتاج: آلکالین فسفاتاز به همراه ژن های Gfra۱، Lin۲۸ و Sall۴، با توجه به ارتباط شبکه ای با یکدیگر و بیان آن ها در سلول های بنیادی پرتوان و رده زایا، می توانند به عنوان فاکتورهای تشخیصی برای این رده های سلولی استفاده شوند.

کلیدواژه ها:

embryonic stem cells ، spermatogonial stem cells ، alkaline phosphatase ، سلول های بنیادی جنینی ، سلول های بنیادی اسپرم ساز (SSC) ، آلکالین فسفاتاز