شناسایی مولکولی باکتری بروسلا در نمونه های کلینیکی منطقه سیستان با روش واکنش زنجیرهای پلیمراز چندگانه

بروسلوز یا تب مالت (تب مدیترانه ای) به واسطه رشد و تکثیر باکتری کوکوباسیل گرم منفی بروسلا در سلول های پستانداران رخ می دهد و این بیماری به عنوان یک بیماری مشترک بین انسان و دام حائز اهمیت می باشد. تست های سرولوژی متعددی جهت شناسایی این باکتری مورد بررسی قرار گرفته اند، با اینحال این روش ها محدودیت هایی در شناسایی دقیق باکتری دارند. پژوهش حاضر، با هدف بررسی و شناسایی مولکولی باکتری بروسلا در نمونه های جمع آوری شده از گوسفندان آلوده در منطقه سیستان با استفاده از تکنیک PCR چندگانه انجام شد. در ابتدا نمونه های خون و شیر از گوسفندان جمع آوری گردید. تایید آلودگی به باکتری در ابتدا با استفاده از نمونه های خون و روش سرولوژی رزبنگال صورت گرفت. در ادامه DNA از شیرهای جمع آوری شده استخراج شد و بررسی مولکولی با استفاده از PCR چندگانه و تکثیر دو ژن Omp۳۱  و BLS به منظور تکثیر قطعات با سایزهای bp ۳۴۷ و bp ۲۵۶ انجام پذیرفت. از ۴۰ نمونه کلینیکی مورد مطالعه همگی تست رزبنگال مثبت را نشان دادند اما بررسی مولکولی با استفاده از PCR چندگانه ۵ نمونه مثبت کاذب تایید شده با تست رزبنگال را نشان داد. استفاده از روش های شناسایی مولکولی به جهت حساسیت و دقت بالاتر و صرف زمان کمتر می تواند به عنوان گزینه مناسب برای شناسایی پاتوژن های بیماری زا مورد استفاده قرار گیرد.

کلیدواژه ها:

باکتری بروسلا ، تب مالت ، ژن BLS ، ژن Omp۳۱ ، PCR چندگانه