کاربرد تکنیک Real-Time PCR به عنوان روشی سریع در تشخیص سندرم ترنر

سندرم ترنر یکی از ناهنجاری های کروموزومی (1 در 2500 نوزاد دختر) است که ناشی از فقدان کامل یا نسبی یکی از کروموزوم های X در زنان است. در حال حاضر روش های مبتنی بر سیتوژنتیک نظیر کاریوتایپ و FISH به طور استاندارد برای تشخیص بیماران و نیز تشخیص قبل از تولد بکار می روند که این روشها عمدتاً پرهزینه و زمان بر بوده و نیاز به کشت سلول های زنده و مهارت بالای تکنیکی دارند. هدف از این مطالعه، بررسی کاربرد تکنیک real-time PCR با استفاده از پروب TaqMan در تشخیص سریع مونوزومی X (سندرم ترنر) می باشد. مواد و روش، پس از استخراج DNA از نمونه ی خون 15 فرد مبتلا به سندرم ترنر و نمونه یخون 10 فرد کنترل نرمال (سالم) با روش رسوب گذاری با نمک، برای ژن (F(VIII به عنوان ژن ه دف (واقع بر کروموزوم X) و ژن PMP22 به عنوان ژن مرجع (واقع بر کروموزوم 17)، پرایمر و پروب مناسب طراحی گردید. سپس واکنش real-time PCR برای ژن های هدف و مرجع انجام شد و نسبت کمی ژن هدف به ژن مرجع F(VIII)/PMP22 با استفاده از فرمول ΔΔCt و( 2(-ΔΔCt محاسبه شد. یافته ها، میانگین نسبت ژن هدف به ژن مرجع، F(VIII)PMP22 ، برای افراد مبتلا به سندرم ترنر، pvalue<0.05 برابر با 0.4867±0.00797 می باشد و برای افراد نرمال این مقدار برابر است به 1.005±0.00342. نتیجه گیری، نتایج بدست آمده از این مطالعه، با نتایج کاریوتایپ سیتوژنتیک مودر تأئید قرار گرفت، لذا تکنیک real-time PCR به عنوان روشی دقیق و حساس و قابل اعتماد در تشخیص سریع مونوزومی X (سندرم ترنر) استفاده کرد.

کلیدواژه ها:

پروب TaqMan ، تکنیک real-time PCR ، سندرم ترنر