بررسی اتصال پروتیین نوترکیب فاکتور رشد عصبی دارای دنباله هیستیدینی به نانوذرات نشاسته متصل به نیکل

امروزه با پیشرفت روزافزون درتکنولوژی پروتیین های نوترکیب و افزایش تجارت داروهای پروتیینی، نیاز به خالص سازی درکوتاهترین زمان ممکن و با صرف کم ترین هزینه دارای اهمیت بسیاری می باشد. در بررسی حاضر پروتیین نوترکیب NGFدارای دنباله پلی هیستیدینی در میزبان باکتریایی coli.E بیان و تولید شد. یکی از روش های معمول برای تخلیص چنین پروتیین هایی با دنباله تمایلی پلی هیستیدینی استفاده از ستون های تجاری IMAC) کروماتوگرافی فلز تثبیت شده) می باشدکه در آنها یون نیکل متصل به رزین ستون قابلیت اتصال به پروتیین های نوترکیب دارای دنباله پلی هیستیدینی و در نتیجهتخلیص یک مرحله ای آنها را دارد. اما به دلیل معایبی که این ستون ها داشته، دست یافتن به جایگزینی مناسب تر و ارزان قیمت تر می تواند شایان توجه باشد.لذا در این بررسی از نانوذرات ارزان قیمت نشاسته به عنوان بستر ستون استفاده گردید. بدین منظور ابتدا نانوذرات نشاسته بااستفاده از روش حلال غیر حلال سنتز، سپس سیتراته و در نهایت به فلز نیکل متصل شدند. میزان اتصال نیکل با تکنیک ICP سنجیده شد. نمونه های پروتیینی استخراج شده از باکتری coli.E که حاوی پروتیین نوترکیب NGF دارای دنباله های پلی هیستیدینی می باشند، به رزین تهیه شده ( نشاسته سیتراته شده متصل به نیکل) اضافه شدند. اتصال پروتیین ها با قرایتجذب در280 نانومتر تایید شد (پروتیین های دارای دنباله هیستیدینی دارای جذب بالایی در 280 نانومتر می باشند). کاهشفاحش جذب نشان دهنده اتصال نمونه های پروتیینی به نانوذرات سیتراته متصل به نیکل می باشد.

کلیدواژه ها:

نانوذرات نشاسته ، کروماتوگرافی فلز تثبیت شده ، تخلیص پروتیین ، نشاسته سیتراته