جداسازی بخشی از cDNAی ژن ترانسفرین (TTf)از رقم بم گندمزراعی تحت تیمار تنش شوری

در میان تنش های غیرزنده، تنش شوری شدیدترین تنش محیطی است که پاسخ به آن، بیانژن های گوناگونی را در گیاه القا میکند که محصولات آنها به طور مستقیم یا غیرمستقیم درحفاظت از گیاهان در مقابل تنش نقش دارند. خاک ها به طور معمول دارای 1-5درصد آهنکل هستند که به راحتی برای گیاهان قابل استفاده نیست. ترانسفرین ها پروتیین های عمومی حاملآهن در سلول های جانوری هستند و در پیوند شدن، متحرک کردن و تحویل دادن یون هایفریک نقش دارند. در این پژوهش سعی شد وجود ژن ترانسفرین (که تاکنون وجود آن درگیاهان عالی گزارش نشده است) در گندم زراعی بررسی و در صورت وجود، جداسازی، کلونو سپس تعیین توالی شود. برای این منظور، بذور رقم بم گندم زراعی در گلدان ها کشت و با آبنمک با ECهای 10و (ds/m)15به ترتیب به مدت 5و 10روز تحت تنش شوری قرار گرفتند ودر مراحل مختلف رشد بوته ها، از برگ های جوان آنها نمونه برداری صورت گرفت. آر.ان.ایکل با استفاده از تریزول استخراج و سپس ساخت cDNAبا استفاده از آنزیم M-MuLVانجامشد. از روی cDNAی ساخته شده توالی ژن هدف با واکنش پی.سی.آر تکثیر شد و در نهایت،واکنش لیگاسیون بین دی.ان.ای الحاقی (بخشی از ژن ترانسفرین) و وکتور pGEM-TEasyانجام و کلنی های ترانسفورم شده از طریق سیستم گزینش بلو-وایت شناسایی شدند. بعد ازهمسانه سازی ژن TTfجداسازی شده و تعیین توالی، توالی بدست آمده شباهت 84درصدی باتوالی ثبت شده موجود در NCBIنشان داد. نتایج این پژوهش وجود ژن ترانسفرین در گیاهانعالی و نیز نقش آن در مقاومت به تنش شوری در آنها را به اثبات رساند و این اولین گزارش ازحضور ژن ترانسفرین در گیاهان عالی بعد از جلبک ها است

کلیدواژه ها:

جداسازی ژن ، ژن ترانسفرین (TTf) ، رقم بم گندم زراعی ، تنش شوری